有關沙門氏菌的檢測方法介紹

由于自身的生物學特點及相關食源性疾病的高爆發率，沙門氏菌成為食源性致病菌重點監控的對象，對食品中沙門氏菌準確、快速的檢測，是預防和控制沙門氏菌食源性疾病發生的有效手段。

現有檢測方法主要包括傳統的培養法、分子生物學及免疫學檢測方法，每種方法都各有特點，為不同食品或環境中沙門氏菌的檢測提供了多種選擇，同時還有將多種方法交叉聯用發展起來的檢測技術，為沙門氏菌快速、高通量的檢測提供了新的思路。

傳統分離培養法

目前用于檢測食品中沙門氏菌基于細菌培養的的主要標準方法有：國際標準 ISO6579-1-2017《食物鏈的微生物學 沙門氏菌檢測, 計數和血清分型用水平方法》，以及 GB 4789.4-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗》。這種傳統分離培養法的檢測過程包括 18~24 h 的預增菌、24 h 的選擇性增菌、48 h 的分離培養以及生化鑒定和血清分型等五個步驟，檢測完成需 4~7 d，更多依賴于手工操作和主觀判斷，敏感與特異性等方面因腸桿菌科細菌間生化反應的交叉而存在一定的局限性。

針對這些問題，現眼于提高菌體富集效率或菌體的分離與鑒定效率對傳統分離培養法進行改良。國際上，HiMedia公司生產了沙門氏菌顯色培養基(貨號：MV1296），該培養基根據特異性的酶底物反應，可對沙門氏菌一步清晰鑒別。沙門氏菌呈淡紫色菌落，并有紫色光暈。大腸桿菌和其他β-葡萄糖醛酸酶陽性菌都顯示為藍色，其他微生物菌落為無色，且添加的是植物源蛋白胨，有效避免了傳播瘋牛病風險，產品特異性強。因而，建立更加快速、簡便、準確的檢測方法，對于預防和控制沙門氏菌感染，保障食品安全十分重要。

符合我國國標GB 4789.28-203《食品微生物學檢驗 培養基和試劑的質量要求》對沙門氏菌顯色培養基相關要求，鑒定沙門氏菌，可選用HiBio-ID生化鑒定卡（貨號：KB011），只需對單菌落純培養物35℃±2℃培養18-24小時即可出結果。優于生化鑒定管，操作簡單，省時省力。

分子生物學法

分子生物學方法通過檢測特異性核酸序列的有無，在遺傳物質水平上鑒定致病菌種屬，在沙門氏菌的檢測中應用廣泛。Elisabetta 等[1]利用 Real-time PCR 技術快速檢測豬肉中的沙門氏菌，檢測結果與國標法完全一致。

可使用HiMedia公司的沙門氏菌檢測試劑盒（qPCR探針法）

研究表明運用分子生物學技術檢測沙門氏菌可大幅提高靈敏度，檢測時間有所縮短，但也同樣存在可能因食品基質的影響而造成錯檢、漏檢的問題。

免疫學法

隨著高特異性抗沙門氏菌抗體的研制、應用和抗體標記技術的發展，沙門氏菌的免疫學快速檢測方法得到了大力發展和廣泛應用。Wang 等[2]利用鼠傷寒沙門氏菌鞭毛蛋白的特異性建立了檢測三明治中的鼠傷寒沙門氏菌的 ELISA 方法。陳晨等[3]用一個基于雙抗體夾心法構建的檢測沙門氏菌的電化學免疫傳感器特異性和穩定性好,?檢測限為1.18×102 CFU/mL。

與其他食源性致病菌的常用免疫學方法類似，運用免疫學方法對沙門氏菌進行檢測，檢測特異性好，快速，靈敏。但這些效果同樣是建立在有高特異性的抗體和適宜穩定的反應體系的基礎上。對于不同的食品基質，同種免疫學方法的檢測效果也會有所不同，需要進行大量實驗并積累一定的數據，以供針對不同情況擇優檢測方案。

參考文獻

[1] Delibato E, Rodriguezlazaro D, Gianfranceschi M, et al. European validation of real-time PCR method for detection of Salmonella spp. in pork meat[J].International Journal of Food Microbiology, 2014,184(4):134-138.

[2] Wang W, Liu L, Song S, et al. A highly sensitive ELISA and immunochromatographic strip for the detection of Salmonella typhimurium in milk samples[J]. Sensors, 2015,15(3):5281-5292.

[3] 陳晨, 竇文超, 趙廣英. 電化學共沉積石墨烯納米金雞白痢和雞傷寒沙門氏菌新型免疫傳感器[J]. 中國預防獸醫學報, 2014,36(1):1-6.

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