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原代細(xì)胞培養(yǎng)小技巧(二)2022-05-23 10:44來源:威正翔禹|締一生物
原代細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中較為重要的一環(huán),同時(shí)該實(shí)驗(yàn)也具有一定的難度,需要掌握一些小技巧,才能更快上手、更好操作、更不容易“翻車”,今天我們就來一起總結(jié)一下,原代細(xì)胞培養(yǎng),都有哪些注意事項(xiàng)。 常見的原代細(xì)胞類型 上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、黑色素細(xì)胞、神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞、肝細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、成骨細(xì)胞、肌細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、滑膜細(xì)胞、毛細(xì)胞、血細(xì)胞、干細(xì)胞。 原代細(xì)胞的優(yōu)缺點(diǎn) 原代細(xì)胞VS細(xì)胞系 能夠培養(yǎng)的細(xì)胞系,已經(jīng)獲得了通過隨機(jī)突變或通過修飾(例如癌癥基因的人工表達(dá))轉(zhuǎn)化的癌細(xì)胞系中的無限增殖(永生化)的能力。連續(xù)細(xì)胞系通常比原代細(xì)胞更堅(jiān)固,更易于操作。它們具有無限的增長潛力,是獲取基本信息的快速簡便方法。使用連續(xù)細(xì)胞系的一些缺點(diǎn)是它們是經(jīng)過基因修飾/轉(zhuǎn)化的,可以改變生理特性并且不代表體內(nèi)狀態(tài),并且隨著時(shí)間的流逝,這可能會(huì)進(jìn)一步改變。 而原代培養(yǎng)得來的細(xì)胞不具備無限分裂的能力,但可以相對更好地還原生物體內(nèi)細(xì)胞生長狀況。 倍增和代數(shù)有什么區(qū)別? 倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)的翻倍,通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的,是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長。 原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中可能存在的錯(cuò)誤 污染:轉(zhuǎn)移主要組織進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)需要注意避免污染。 pH值變化:這可能是由于培養(yǎng)基中的鹽分不正確,細(xì)菌或真菌污染,碳酸氫鹽緩沖液不足,二氧化碳張力不正確等引起的。 粘附性不足(細(xì)胞不貼壁):培養(yǎng)基中不含附著因子(attachment factors)或附著因子不足,培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基污染,細(xì)胞被胰蛋白酶過度消化等。 生長緩慢:原因包括培養(yǎng)基的pH值變化,必需的促進(jìn)生長的成分/因子耗盡,低污染,試劑儲(chǔ)藏不當(dāng)?shù)取?/span> 細(xì)胞死亡:溫度波動(dòng),二氧化碳含量過低,在融化和/或冷凍保存過程中細(xì)胞受損,有毒代謝產(chǎn)物濃度增加,培養(yǎng)基中的滲透壓失衡導(dǎo)致細(xì)胞存活率降低。 沉淀(pH不變):由于使用了冷凍培養(yǎng)基,在pH不變的培養(yǎng)基中可能會(huì)出現(xiàn)沉淀,殘留的磷酸鹽殘留在用洗滌劑洗滌時(shí)可能會(huì)沉淀出粉末狀的培養(yǎng)基成分。 細(xì)胞結(jié)塊(細(xì)胞不貼壁且結(jié)塊):懸浮細(xì)胞可能由于鈣、鎂離子的存在或細(xì)胞裂解及DNA釋放(過度用蛋白水解酶消化)而結(jié)塊。 誘導(dǎo)變異性:多種試劑和培養(yǎng)基會(huì)誘導(dǎo)原代細(xì)胞的數(shù)據(jù)產(chǎn)生變異,研究者的處理手法也可能導(dǎo)致原代細(xì)胞的數(shù)據(jù)產(chǎn)生變異。 血清在細(xì)胞培養(yǎng)過程中的重要性不言而喻:
一款優(yōu)質(zhì)的血清,絕對能成為細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的“最強(qiáng)輔助”。 Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清與市面上其他品牌血清相比,有獨(dú)特優(yōu)勢: 1. 精選內(nèi)毒素更低批次(≤3EU/ml),原裝進(jìn)口。是細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目十幾年的穩(wěn)定供應(yīng)品牌。 2. 新批次在試用前,提供試用服務(wù),養(yǎng)細(xì)胞更放心。 3. 每個(gè)批次產(chǎn)量800-2000升,試用滿意的實(shí)驗(yàn)室批號(hào)優(yōu)先鎖定,保證大多數(shù)項(xiàng)目兩年不需換批次,細(xì)胞試驗(yàn)數(shù)據(jù)穩(wěn)定。 4. 每年按廠家生產(chǎn)順序,會(huì)有多批次平行供應(yīng),每個(gè)實(shí)驗(yàn)室專屬批號(hào)管理,保證供貨穩(wěn)定。 5. 為Ausbian血清用戶免費(fèi)提供申報(bào)支持,具有完整的檢測報(bào)告,為各類項(xiàng)目的申報(bào)提供支持。(同時(shí)為血清VIP用戶在支原體檢測、方法學(xué)驗(yàn)證等方面,提供更多免費(fèi)延伸性技術(shù)幫助)。 6. 針對特殊科研項(xiàng)目,可提供3-5個(gè)平行批次,讓試驗(yàn)人有更多選擇空間。 7. 為Ausbian血清提供免費(fèi)代儲(chǔ)存服務(wù),為儲(chǔ)存空間不足的實(shí)驗(yàn)室提供可靠的血清倉儲(chǔ)保護(hù),按要求隨時(shí)發(fā)貨。 8. Ausbian血清從出廠,到實(shí)驗(yàn)室,全程低溫冷鏈保護(hù),確保血清無反復(fù)凍融。 9. 免費(fèi)真品保障,每個(gè)血清瓶身加貼Viansaga?易破損防偽標(biāo)簽,Ausbian品牌真品保護(hù),逢假必究,為實(shí)驗(yàn)室做好售后保障。 10. 免費(fèi)無憂售后,所有實(shí)驗(yàn)室簽收的Ausbian胎牛血清,從簽收日開始計(jì)算,一年之內(nèi),血清在妥善保管、未開封未融化、且不影響二次銷售的情況下,均可享受無條件退貨或換貨的售后保障。 11. 免費(fèi)專業(yè)幫助,匯集近二十年,千萬個(gè)血清用戶細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),為各種細(xì)胞培養(yǎng)提供問題梳理分析,解決方案參考。 12. Ausbian品牌擁有全系列血清產(chǎn)品線: 特級(jí)胎牛血清、細(xì)胞治療專用胎牛血清(貨號(hào):WS500T(紅點(diǎn))),透析胎牛血清 (貨號(hào):VS500TZ )等多系列產(chǎn)品,服務(wù)更專業(yè)更精準(zhǔn)。 如果你對本公司產(chǎn)品感興趣,想要了解更多,歡迎訪問 北京締一生物官網(wǎng): www.dyshengwu.com 上海威正翔禹生物網(wǎng)站: m.13851990668.com 或聯(lián)系北京締一生物公司 咨詢熱線: 400-166-8600 010-84118494 021-64186645 13811167915 咨詢QQ: 1580434811 咨詢QQ: 1258888686 客服郵箱:servicebj@viansaga.com 客服郵箱:servicesh@viansaga.com 聲明:本網(wǎng)站所有注明“來源:締一生物”的內(nèi)容,版權(quán)均屬于北京締一生物網(wǎng)站所有,受到知識(shí)產(chǎn)權(quán)的法律保護(hù)。如需引用、轉(zhuǎn)載,須注明來源及原文鏈接。如內(nèi)容涉及實(shí)質(zhì)性修改,須來電獲取書面授權(quán),且轉(zhuǎn)載時(shí),須注明“來源:締一生物”。 最終解釋權(quán)歸締一生物所有。 下一篇: 使用胎牛血清,這些你必須知道(一)
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