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新生牛血清中的微生物檢查

2020-04-22 10:22來源:威正翔禹|締一生物

新生牛血清質(zhì)量好壞對細胞形態(tài)及生長情況的影響很大,尤其是要保證其無微生物的污染,因為微生物對細胞的污染會造成實驗結(jié)果的偏差,對生物制品的安全性也構(gòu)成威脅。

新生牛血清.jpg

國內(nèi)外的相關部門都提出了一系列的質(zhì)量檢測指標。但也有人指出其不足,如對外源微生物的檢測項目較少、不能涵蓋所有微生物的檢測;檢測精確度也受到方法本身的限制而不能達到很高的水平。為此, 建立快速、高效、廣譜的新生牛血清外源因子檢測方法是非常必要的。


有生物制品機構(gòu)開發(fā)出電鏡監(jiān)測微生物的方法。其主要采取的是膜表面富積法來制備電鏡樣品。將有膜電鏡載網(wǎng)放入裝有新生牛血清的離心管中, 5000 rPmin 離心, 然后取出載網(wǎng)負染。同時設立實驗組和對照組。對于細菌,設置電鏡放大1萬倍,觀察時間為 30分鐘, 當5 分鐘內(nèi)檢出細菌記為/ + + + , 10分鐘檢出細菌記為/ + + , 30 分鐘內(nèi)檢出記為/ +。對于病毒,設置電鏡放大3萬倍,借助目鏡觀測, 5分鐘內(nèi)檢出 n種記為/ n+ + +,10分鐘內(nèi)檢出記為/ n+ +,30分鐘內(nèi)檢出記為/ n+。研究人員選擇了三種國內(nèi)外不同新生牛血清的牌子,每個牌子的血清又選擇了3-10個批次。結(jié)果顯示,用培養(yǎng)基進行無菌檢測時,大部分做的比較好,只有一個牌子的一個批次出現(xiàn)細菌檢測陽性,其余皆陰性。但用電鏡檢查時,對照組皆為陰性,但實驗組的大部分都是陽性(陽性率高達95.6%)。病毒的陽性率為34.8%。

在方法上,作者認為,與膜表面富積法制備的新生牛血清電鏡樣品相比, 常規(guī)負染法只能獲得極少的觀測視野, 且附著粒子極少。而膜表面富積法所制樣品可以在每個網(wǎng)孔取得觀測視野,粒子附著率應提高104~105倍。該方法只要求血清中的微生物絕對數(shù)量, 不要求微生物的顆粒密度,這樣即使在微生物密度極低的情況下, 也能有效利用電鏡進行有效檢測。


作者認為,對于污染程度極低的血清, 要經(jīng)過多個數(shù)量級的放大后才能在細胞

培養(yǎng)中體現(xiàn)出來。而采用針對性強的病毒檢測方法不能保證血清完全避免病毒污染。因此,新生牛血清生產(chǎn)企業(yè)應不斷改進生產(chǎn)和檢測工藝, 提高產(chǎn)品的質(zhì)量, 滿足使用單位不斷提高的質(zhì)量要求。


Ausbian精制新生牛血清系新西蘭血源,澳洲生產(chǎn),出廠前經(jīng)嚴格質(zhì)控,符合國際各項標準。血清經(jīng)過0.22微米過濾和15kGy的gamma射線照射滅能,可殺滅細菌、支原體,無微生物風險,可滿足廣大用戶對新生牛血清的品質(zhì)需求。