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檢測水中大腸埃希氏菌O157:H7的HiMedia顯色培養(yǎng)基2019-09-27 10:00來源:威正翔禹|締一生物
現(xiàn)在,市面上能見到的顯色培養(yǎng)基大多用于食品和臨床,但HiMedia廠家生產(chǎn)的顯色培養(yǎng)基覆蓋面廣,能用于供水行業(yè)和環(huán)境監(jiān)測站。下面為您介紹一下。 顯色培養(yǎng)基的評價常有多個指標(biāo),如靈敏度,特異性等,它們也與所檢測的樣本類型有關(guān)。生產(chǎn)廠家經(jīng)常不提供這些指標(biāo)。但一些第三方檢測中心或研究機(jī)構(gòu)對此則有相關(guān)研究,并發(fā)表在專業(yè)期刊上。 2011年,《學(xué)術(shù)研究國際期刊》發(fā)表了一篇對顯色培養(yǎng)基的比較研究。作者來自埃及國家研究中心水污染研究部,他們通過用顯色培養(yǎng)基檢測了水中的大腸埃希氏菌O157:H7,對顯色培養(yǎng)基進(jìn)行了評價(見參考文獻(xiàn)1)。 作者指出,在水中,E. coli O157:H7可以極低水平存在,伴隨大量競爭菌群。傳統(tǒng)方法需要超過48小時完成培養(yǎng),同時還需進(jìn)一步的生化鑒定和血清學(xué)鑒定。依據(jù)原理主要是SMAC平板,在麥康凱瓊脂基礎(chǔ)上用山梨醇替代乳糖,E. coli O157:H7不能發(fā)酵山梨醇。該方法存在一定的偏差,因?yàn)橛行〦. coli O157:H7菌株可以發(fā)酵山梨醇。 顯色培養(yǎng)基的出現(xiàn)可改善這一檢測方法。研究者采用HiMedia公司生產(chǎn)的HiCrome EC O157:H7 Selective agar。因?yàn)榇嬖谔禺愋燥@色底物,E. coli O157:H7菌落呈現(xiàn)深紫色,E. coli菌落則呈現(xiàn)淡粉色至淡紫色。 研究者收集了尼羅河地表水的60個水樣本。收集水平遵照了200年APHA發(fā)布的指南。所有水樣均收集在無菌的1L玻璃瓶中(Simax品牌,捷克共和國產(chǎn)),并在4℃條件下運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室。所有樣品在收集后6小時內(nèi)進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查。 研究用的E. coli O157:H7標(biāo)準(zhǔn)菌株編號為ATCC 43895。研究者除采用了HiMedia出的HiCrome EC O157:H7 Selective agar(簡稱HEC)外,還采用了美國Biolog 產(chǎn)的Rainbow agar O157(簡稱RB)。該平板為無色,在上面E. coli菌落呈現(xiàn)紅紫藍(lán)黑等不同顏色,E. coli O157:H7呈現(xiàn)深灰色至深黑色。而其他葡萄糖醛酸酶陽性菌株呈現(xiàn)紅色或洋紅色菌落。該培養(yǎng)基添加有新生霉素和亞碲酸鹽。 研究遵循了2005年APHA指南,采用薄膜過濾法對E. coli O157:H7進(jìn)行了檢測和計(jì)數(shù)。濾膜放置在培養(yǎng)基上,37℃倒置孵育24小時。對典型菌落計(jì)數(shù),單位為CFU/100 ml。菌落的進(jìn)一步確證采用PCR法。最終計(jì)算得出靈敏度(真陽性率)、特異性(真陰性率)、總有效率(即(真陽性+真陰性)×100/總數(shù)),并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(t檢驗(yàn))。 結(jié)果見表1、表2、表3和表4。 表1. 在不同培養(yǎng)基上,E. coli O157:H7標(biāo)準(zhǔn)菌株的菌落特征
表2. 非E. coli O157:H7菌株在不同培養(yǎng)基上的菌落情況
表3. 培養(yǎng)基分離標(biāo)準(zhǔn)菌株的有效性
表4. 60個尼羅河水樣在不同培養(yǎng)基上E. coli O157:H7的假陽性率
可見,HiCrome EC O157:H7 Selective agar分離E. coli O157:H7具有更高的靈敏度和特異度,并已被PCR進(jìn)一步確證。顯色培養(yǎng)基不失為一種靈敏、快速、特異的方法,并且無須任何確證試驗(yàn)。 HiMedia公司是國際知名微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,具有40多年生產(chǎn)研發(fā)經(jīng)驗(yàn),具有WHO-GMP認(rèn)證、ISO9001,ISO13485質(zhì)量體系認(rèn)證和CE、FDA注冊登記。產(chǎn)品已行銷世界上140多個國家。 締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測領(lǐng)域,一如既往地為您帶來優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。如需詳細(xì)了解,可訪問公司官網(wǎng): http://m.13851990668.com/ 咨詢電話:400-166-8600 參考文獻(xiàn) R.S. Al-Wasify, G.E.El-Taweel, M.M. Kamel, M.A.El-Laithy.Comparative Evaluation of Different Chromogenic Media for Detection of E. coli O157:H7, Listeria monocytogenes and Salmonella spp. in Water. International Journal of Academic Research. 2011,3(3):113-117 |