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國標中檢測阪崎腸桿菌操作方法

2018-09-26 10:18來源：締一生物


阪崎腸桿菌屬于腸桿菌科，它對所有年齡段的人都易感，尤其是嬰幼兒。本文主要介紹國標中檢測克羅諾桿菌屬（阪崎腸桿菌）的操作方法。


前增菌和增菌


取檢樣100g(mL)置滅菌錐形瓶中，加入900mL已預熱至44 ℃的緩沖蛋白胨水，用手緩緩地搖動至充分溶解，36 ℃±1 ℃培養18h±2h。移取1mL轉種于10mL mLST-Vm 肉湯，44 ℃±0.5 ℃培養24h±2h。


分離


輕輕混勻 mLST-Vm 肉湯培養物，各取增菌培養物1環，分別劃線接種于兩個阪崎腸桿菌顯色培養基平板，顯色培養基須符合 GB4789.28的要求，36 ℃±1 ℃培養24h±2h，或按培養基要求條件培養。


顯色培養基推薦使用國際上HiMedia公司生產的阪崎腸桿菌顯色培養基（貨號：MV1577），該培養基適用于從食物、牛奶和奶制品中分離鑒定阪崎克羅諾桿菌屬（阪崎腸桿菌），采用無瘋牛病風險的植物蛋白胨取代了動物蛋白胨，產品有GMP，CE和FDA，ISO9001，ISO13485國際認證證書，安全可靠，產品符合國標克羅諾桿菌屬（阪崎腸桿菌）檢驗國家標準（GB4789.40—2016）相關要求，是國標中首選產品。


挑取至少5個可疑菌落，不足5個時挑取全部可疑菌落，劃線接種于 TSA 平板。25 ℃±1 ℃培養48h±4h。


鑒定


自TSA 平板上直接挑取黃色可疑菌落，進行生化鑒定。克羅諾桿菌屬的主要生化特征見表1。可選擇生化鑒定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統。


表 1 克羅諾桿菌屬的主要生化特征