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細胞活性檢測方法2024-05-16 15:39
細胞活性的檢測方法有多種,以下是一些常見的方法: 染色計數法: 化學染色法:如臺盼藍染色法,利用死細胞和活細胞對染料的不同親和力,通過顯微鏡觀察細胞的染色情況來判斷細胞活性。臺盼藍可穿透變性的細胞膜,與解體的DNA結合,使其著色,而活細胞能阻止染料進入細胞內,故可以鑒別死細胞與活細胞。 熒光染色法:利用熒光染料對活細胞和死細胞的不同反應,通過熒光顯微鏡檢測細胞活性。例如,碘化丙啶(PI)被活細胞排斥但能穿透正在死亡或已經死亡細胞的細胞膜,因此活細胞不被染料上色,只有死細胞或凋亡細胞才能被染上紅色。 代謝活性檢測: MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴化物)試驗:通過測量活細胞中線粒體脫氫酶的活性來評估細胞增殖和活性。 XTT試驗:在健康細胞中,XTT通過線粒體酶轉換成橙色的甲瓚染料,然后檢測450nm處的相對吸光度來估計活細胞數量。 刃天青檢測:將刃天青試劑添加到細胞培養物中,在健康細胞中,刃天青試劑通過脫氫酶還原成為熒光試鹵靈,最終試鹵靈的量與樣品中的活細胞成比例。 細胞增殖能力檢測: CCK-8(Cell Counting Kit-8)試驗:類似于MTT,但使用水溶性四唑鹽WST-8,減少了實驗步驟。 BrdU(5-溴脫氧尿苷)摻入試驗:通過檢測BrdU在DNA合成期的摻入來評估細胞增殖和活性。 細胞凋亡檢測: Annexin V/PI染色:通過流式細胞儀檢測細胞膜磷脂酰絲氨酸外翻和細胞膜完整性來識別早期和晚期凋亡細胞。 還原性染料檢測法:使用發光/熒光指示劑(如WST-8和刃天青)監測細胞的代謝活性。 熒光酯酶底物檢測法:通過測量細胞酶活性和膜完整性來確定細胞活性。細胞內酯酶將底物水解成熒光化合物,熒光化合物的信號強度與活細胞數量成正比。 線粒體膜電位檢測法:利用線粒體膜電位的變化來評估細胞活性。 以上方法各有特點和適用場景,可以根據實驗的具體需求和條件選擇合適的方法。 上一篇: PCR法檢測支原體的實驗技術
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