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什么是熒光定量pcr的絕對定量

2024-05-06 16:02

熒光定量PCR的絕對定量是一種利用熒光信號的變化對PCR過程進行實時監控,從而實現對初始模板的定量分析的方法。在這個過程中,需要使用已知拷貝數的絕對標準品,并制作標準曲線。

需要有一個已知拷貝數濃度的樣品作為標準品,將其稀釋至少5個梯度(理論上,每稀釋10倍,Ct值增大3.33)后和待測樣品同時上機進行定量檢測。然后,以標準品拷貝數的Log值為橫坐標,以標準品的Ct值為縱坐標繪制標準曲線方程。最后,將檢測獲得的待測樣品的Ct值帶入標準曲線方程中,就能求得待測樣品的拷貝數濃度。

這種方法可以精確地測量出某個基因在初始樣品中的具體拷貝數或濃度,為科學研究提供了重要的數據支持。