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細(xì)胞培養(yǎng)實驗前期準(zhǔn)備工作內(nèi)容

2023-09-20 15:35
文章附圖

細(xì)胞實驗前期的準(zhǔn)備很重要,有計劃的準(zhǔn)備和了解細(xì)胞實驗過程,才能把細(xì)胞養(yǎng)好。下面詳細(xì)說說細(xì)胞實驗前期需要準(zhǔn)備的事項:

1、準(zhǔn)備無菌環(huán)境

千里之堤潰于蟻穴,細(xì)菌、真菌、支原體等微生物的生長速度塊和破壞力強(qiáng),會破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),影響實驗結(jié)果。使用紫外線照射、定期用專用試劑進(jìn)行實驗室清潔等,都有助于降低細(xì)胞污染的風(fēng)險。

2、了解細(xì)胞的生長習(xí)性

不同的細(xì)胞生長習(xí)性不同。如成纖維細(xì)胞是貼壁生長,有一定的密度依賴性,密度小可能會出現(xiàn)不增殖,狀態(tài)差的情況,接種密度大時則需要隔天傳代,頻繁傳代則影響細(xì)胞狀態(tài);再如RPMI-8226人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞,是懸浮生長的,傳代需離心棄去上清即可。總之,了解細(xì)胞生長習(xí)性,再加上正確的計數(shù),才能掌握好傳代的密度。

3、選擇正確的培養(yǎng)基

在養(yǎng)細(xì)胞之前,就要了解,你所養(yǎng)細(xì)胞的來源以及種類和名稱。

選擇正規(guī)途徑來源的細(xì)胞,索取細(xì)胞培養(yǎng)條件,并查閱文獻(xiàn),確定所需培養(yǎng)液種類以及是否需要添加特殊成分,常用的細(xì)胞培養(yǎng)液有DMEM、RPMI1640、F12等等,一些常見的細(xì)胞基本可以使用這幾種培養(yǎng)基中的一種來培養(yǎng),有的需要加入一定其他成分,這需要根據(jù)不同的細(xì)胞類型,查ATCC細(xì)胞庫或者查文獻(xiàn),才能找到所需**培養(yǎng)液。選擇正確的培養(yǎng)液是養(yǎng)好細(xì)胞的**步。

4、選擇優(yōu)質(zhì)的血清

血清中含有細(xì)胞生長所必須的生長因子,作為哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)的附加物,血清的添加是十分重要的,因此,選擇優(yōu)質(zhì)的血清,是細(xì)胞培養(yǎng)成功與否的關(guān)鍵!Ausbian進(jìn)口胎牛血清,內(nèi)毒素含量低,澳洲血源,全程冷鏈運輸,為細(xì)胞培養(yǎng)保駕護(hù)航。

透析胎牛.png