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如何祛除「普通細胞」的支原體污染?

2022-09-29 16:36

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  支原體

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  污染

  細胞污染支原體,是令細胞培養相關從業者十分頭疼的問題。細胞感染了支原體又不愿丟棄怎么辦?本系列內容分情況為大家解答。

  01普通細胞支原體祛除

  適用范圍

  對于費力擴增的細胞(如已轉染,或經過體外刺激),如果細胞中發現有支原體污染,但此細胞又不愿丟棄,希望繼續培養,推薦使用MB公司生產的復合抗生素Zell Shield?。

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  02.Zell Shield?特點

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  ·特點

  高效廣譜:Zell Shield?通過阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。

  安全:無細胞毒性,采用復合支原體敏感抗生素,對大多數細胞株無毒。

  活性穩定:在細胞培養期間,Zell Shield?始終保持穩定的活性。

  使用方便:Zell Shield?為無菌溶液,可直接加入培養基使用。

  03.Zell Shield?使用方法

  使用方法

  (1)在每次使用Zell Shield?之前,細胞傳代時,先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細胞,再使用加了Zell Shield?的培養基養細胞,能達到**的祛除支原體的效果。

  (2)Zell Shield?常規為-18℃保存,建議使用前,先融化分裝,仍舊-18℃避光保存,使用時按需融化配置。避免反復凍融。

  (3)Zell Shield?按1:100濃度可直接加入培養基。例如:500ml培養基中添加5ml Zell Shield?,50mL/瓶的Zell Shield?可供5L培養基使用。

  什么是懸浮沖洗法

  據研究表明,約98%的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。細胞傳代時,用干凈的PBS反復懸浮沖洗,就能把70%以上的支原體沖下來。

  支原體直徑在180~350nm之間,遠遠小于細胞直徑。通過低速離心,很容易將細胞和支原體分離,棄上清即可祛除大部分支原體。

  簡要步驟

  消化細胞

  ?

  離心

  ?

  棄上清

  ?

  PBS清洗細胞

  ?

  低速離心棄上清

  重復清洗3次

  ?

  加入含有Zell Shield?的

  新鮮培養基

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