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動物源培養基Yes or Not?

2022-07-28 15:35來源:締一生物

引言

圖片


多數情況下,動物細胞的體外培養均依賴動物血清而生長,脫離血清,細胞將無法生長。目前,使用較多的是各類牛血清,例如:胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、成牛血清等,也有一些細胞培養會用到馬血清。


但也有研究人員認為,細胞培養基中的牛血清,可能存在一定外源異種物質污染的風險,臨床中使用的生物制品中如果有牛血清的殘留,還有可能會引起過敏等反應。


于是無動物源成分培養基(Serum-Free Media)便應運而生。其中添加了血清中所含有的已知成分:粘附因子、生長因子、必需的營養物質和激素等,還有一些蛋白來源于重組蛋白或者蛋白水解物。能在一定程度上模擬血清的功能,幫助細胞生長。但無血清培養基中所能添加的因子有限,不能100%還原血清成分,因此對于細胞的保護和支持都不如含有血清的培養基。


那么在細胞培養過程中,含動物源成分培養基與無動物源性培養基到底該如何選擇?本期內容,就來盤點這二者的優缺點,希望對小伙伴們選擇培養基或是血清提供幫助。


文章篇幅較長,目錄已經搭好,供大家預覽!


★ 目錄 ★

含動物源成分培養基

無動物源成分培養基

動物源VS非動物源該如何選擇?


一、含動物源成分培養基

1、典型代表:血清

這里以血清為典型動物源成分為代表。

血清的本質是血液或血漿經過凝血處理(血小板激活)后,再經過濾等處理所得到的上清液。有學者認為,血清中含有血小板激活后釋放的各種生長因子,因此可以支持多種細胞生長。

2、含血清培養基優勢

(1)含動物源成分,如血清,提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必需的物質。

(2)提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質激素(氫化可的松、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。

(3)提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。

(4)提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。

(5)對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發現的,現在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養攪拌時,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用,如硒等。


3、含動物源成分培養基不足

人用或獸用藥物生產過程中,血清中不明成分,作為異源物質,可能會引起人或動物的免疫/排異反應。

二、無動物源成分培養基

1、無動物源成分培養基

基于生產藥物的安全考慮,培養基中的添加組分無動物來源,需要的蛋白來源于重組蛋白或者蛋白水解物,這些組分可以保障細胞生長及增殖的需要后來又衍生出完全不用動物來源的蛋白(但有來自于植物蛋白的水解片段,或合成多肽片段等其他衍生物等部分添加物)的培養基。

2、無動物源成分培養基優勢

避免所生產的藥物,因動物源成分而產生的毒性。

3、無動物源成分培養基不足

(1)無法為細胞提供保護作用:細胞在無血清培養基中易受某些機械因素和化學因素的影響。

(2)部分產品成本較高,保存條件要求嚴格。

(3)具有高度特異性:一種無血清培養基僅適合某一類細胞的培養。處于發育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方,對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。

(4)容錯性較差:而且在去除血清的同時,也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用,因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。

(5)種類繁多,具有高度特異性:每一種類型的細胞都需要一種培養基配方。

(6)細胞增殖影響:通常在無血清培養基中細胞生長緩慢,有限細胞系的傳代次數也減少。

動物源VS非動物源

如何選擇?


含動物源成分培養與不含動物源成分培養基,各有優缺點,如何選擇還是應該根據實驗需求、使用場景來定。


某些特定的工業生產會更青睞無血清培養基(工業生產用的無血清培養基可以大批量生產,能將成本壓至更低)


而用于大部分科研的培養基,從實驗成本和實驗效果角度出發,絕大部分研究人員還是更偏愛血清培養基。


兩大類型培養基的優缺點已經給大家梳理清楚,在選擇培養基的時候更可以做到心中有數啦!


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