DIY外泌體專用血清的常用方法

各位小伙伴們，晚上好！

今天文章的主題是無外泌體血清。

外泌體大家應該都很熟悉。1983年，在綿羊網織紅細胞中**發現了現在生物學研究領域炙手可熱的“小網紅”——一種特殊囊泡結構，并與1987年正式被命名為“exosome”。

越來越多的科研人員投入到外泌體的研究中，根據PubMed統計顯示，最近幾年，外泌體研究呈爆炸增長。

外泌體的研究離不開細胞培養。以腫瘤相關外泌體研究為例，目前，收集腫瘤細胞外泌體主要有兩種方法：

從現有的一些研究可以看出[1][2][3][4][5]，研究人員更傾向于方法二，也就是使用exosome-free FBS培養細胞再收上清分離exosomes的方法，至少腫瘤研究方面是這樣的。

相關文獻在這里

所以，接下來就不得不講講exosome-free FBS——無外泌體血清了。

顧名思義，無外泌體血清就是外泌體含量極低，低到幾乎沒有的血清（以粒徑分析結果為標準），獲得主要有兩種途徑：

直接購買商品化的產品

自己DIY制備

如果選擇自己制備無外泌體血清，最常用的方法就是超速離心法。主要有三種策略：（前提是將血清用正確的方法徹底解凍，分裝，按照實驗需求選擇合適用量進行去除外泌體的實驗，血清解凍方法請參照這里：如何解凍血清才能**程度保證活性？）

P.S.其中，離心的過夜時間要視情況而定，一般在10-14小時之間，也可適當延長離心時間。

需要注意的是，離心后，外泌體會富集在試管底部，在吸取上層血清的時候，不要觸碰底部沉淀，避免吸到沉底的外泌體，“一夜回到解放前”。

另外，只吸取80%左右的上層血清，其余的渾濁血清留作其他非外泌體用途細胞的培養，畢竟血清也挺貴的，避免不必要的浪費。

針對超速離心后的血清，可進行粒徑檢測（離心前樣品和離心后樣品），如果覺得純度不夠，再把離心后收集的血清做二次超速離心。

當然啦，以上方法也只是我們根據已有文獻和相關實驗室的經驗總結的來的，僅供大家參考，如果有更好的方法，也歡迎在評論區和我們交流！

選擇自己手動DIY無外泌體血清，可以在一定程度降低血清的成本，Ausbian血清，高品質，實驗更安心，用來DIY成外泌體實驗專用血清也是不錯的選擇。