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簡析透析胎牛血清的應用2020-08-21 15:47來源:威正翔禹|締一生物
胎牛血清常用于細胞培養。但有一些實驗則需要透析胎牛血清。 下面小編就來和大家講一下透析胎牛血清。 透析胎牛血清和胎牛血清的**區別是,前者透析祛除了分子量在1萬以下的小分子,如葡萄糖、鹽、氨基酸、激素,此外在其他工藝方面沒有任何區別。 透析胎牛血清也是用于細胞培養,但同時,又有自己的一些特殊應用。其用途可歸納如下: 一、摻入研究 例如:有人研究呼吸道合胞病毒的宿主特異性:即為什么它只感染呼吸道上皮細胞,而不感染其他細胞。 他們將該病毒的F蛋白(融合蛋白)序列克隆入質粒內,并轉染293T細胞。轉染后第20小時,細胞先在不含蛋氨酸和半胱氨酸的DMEM+透析胎牛血清中培養了45分鐘(讓細胞處于饑餓狀態,因培養基中缺少氨基酸),再在同樣上述培養基中培養,但添加了35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸。 培養4小時后進行分析。即裂解細胞后,用抗F蛋白的抗體捕獲F蛋白、跑膠并進行放射自顯影,分析F蛋白的表達情況。發現F蛋白的表達確實增加了,但突變后的F蛋白表達卻無任何變化。結果證實,野生型的F蛋白確實參與病毒對宿主細胞的侵襲。
值得指出的是,用35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸用來標記細胞內的蛋白,結合免疫沉淀用于觀察在某一過程中發生的某一蛋白的變化,從而發現該蛋白所扮演的角色,的確是一個普遍有效的方法(在研究信號分子磷酸化的方面,則需要使用32P標記的磷酸鹽)。 在這其中,透析胎牛血清的使用必不可少,即給細胞創造一個無外源氨基酸干擾的環境。 二、細胞水平的藥物篩選 例如:有人要從化合物庫中篩選S1P4受體的拮抗劑,以抑制流感病毒帶來的免疫激活導致的肺損傷。他采用報告基因進行監測。為了避免細胞培養環境中存在的小分子的干擾,他也需要用10%的透析胎牛血清加McCoy's 5A培養基來培養細胞。 類似在藥物研發過程中,采用特定啟動子操縱的熒光素酶報告基因,基于細胞平臺的高通量藥物篩選,也都需要無外源小分子的培養體系,因而也要用透析胎牛血清。 三、細胞克隆的篩選 包括雜交瘤細胞和CHO細胞等,由于在進行細胞篩選時,需要無外源小分子如次黃嘌呤和胸腺嘧啶等的干擾,因此也需要用到透析胎牛血清。 目前市面上有一款低調的透析胎牛血清進口品牌Ausbian。它在近些年備受實驗人員青睞。下面給您介紹一下: 中文名:Ausbian?透析胎牛血清 英文:Fetal Bovine Serum Sterile Filtered, Dialyzed 品牌:Ausbian? 產地:澳洲 貨號:VS100TZ,VS500TZ 批號:見瓶身 規格:100ml/瓶,500ml/瓶 Ausbian?透析胎牛血清為澳洲進口,是在當地政府獸醫部門的監督下從注冊的出口屠場采集,國際GMP品質生產,嚴格質控,符合國際動物協會要求。 產品描述 1.在Ausbian?特級胎牛血清基礎上,透析過濾去除10KDa以下小分子,避免外源小分子對細胞的干擾。 2.精選內毒素更低批次,細胞更健康。 3. 每個批次提供完整的檢測報告。 4.全程冷鏈運輸,不出現凍融現象,保證質量不受影響。 5.100毫升,500毫升多種包裝選擇,適合不同實驗用量需求。 6.國內現貨儲備,避免國際貨運風險。 上一篇: 成纖維細胞關鍵分子調控癌細胞耐藥性
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