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微生物法測(cè)定維生素B12，要用優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基

2020-08-20 13:43來源：威正翔禹|締一生物

維生素B12，是人體必需維生素，在維持機(jī)體正常造血和神經(jīng)功能健全中起到至關(guān)重要的作用。因此，對(duì)于嬰幼兒配方乳品和營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充食品中，測(cè)定維生素B12十分必要。


我國(guó)《GB 5413.14—2010食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中維生素B12的測(cè)定》規(guī)定了采用萊士曼氏乳酸桿菌（ATCC 7830）測(cè)定維生素B12的整個(gè)流程。實(shí)際亦有多篇報(bào)道，肯定了微生物法的準(zhǔn)確可靠，并且測(cè)定樣品還包括腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)粉劑、多維元素片、維生素飲料以及含乳飲料等［1-4］。


微生物法的原理是，根據(jù)試驗(yàn)菌株對(duì)微生物B12的特異性和靈敏性，在含有除維生素B12以外所有營(yíng)養(yǎng)的【測(cè)定培養(yǎng)基】中，加入標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液以及未知待測(cè)樣品溶液，根據(jù)微生物生長(zhǎng)產(chǎn)生的透光率，對(duì)待測(cè)樣本中微量的微生物B12進(jìn)行測(cè)定。


其中，測(cè)量的準(zhǔn)確度尤其依賴于維生素B12在一定濃度范圍內(nèi)與透光率呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。而是否呈良好的線性，又與所用的【測(cè)定培養(yǎng)基】有很大的關(guān)系。有機(jī)構(gòu)采用了不同品牌的【維生素B12測(cè)定培養(yǎng)基】進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)兩個(gè)國(guó)產(chǎn)品牌培養(yǎng)基的接種空白依然有生長(zhǎng)，勉強(qiáng)可獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線，但線性結(jié)果不理解。而進(jìn)口品牌的“標(biāo)準(zhǔn)曲線明顯梯度正生長(zhǎng), 獲得較理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線, 線性結(jié)果較理想”［5］。


參考文獻(xiàn)

1. 蔣孟虹，許蘋，秦峰，劉浩，楊美成. 微生物法測(cè)定腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)粉劑中微量維生素B12的含量［J］.食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2016,7(3):893-897

2. 盧京光，裴琳，楊龍華．在線微生物濁度法測(cè)定多維元素片中微量維生素B12的含量[J]．藥物分析雜志,2011,031(009):1837-1839

3. 陳亞波，周敏，楊彤．微生物法測(cè)定維生素飲料中的維生素B12[J]．浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013,000(007):863-865

4. 林耀文，佘之蘊(yùn)，李姣，蘇妙儀，范安妮，張施敬，王力清．微生物法測(cè)定含乳飲料中維生素B12含量[J]．飲料工業(yè),2013,016(004):39-42

5. 陳緒華, 劉健, 江一飛. 不同測(cè)定培養(yǎng)基對(duì)維生素B12線性的影響[J]. 生物技術(shù)世界, 2013(04):53+131


下面小編向您推薦一款進(jìn)口優(yōu)質(zhì)【維生素B12測(cè)定培養(yǎng)基】。

生產(chǎn)商HiMedia Laboratories是全球**的微生物培養(yǎng)基供應(yīng)商，

生產(chǎn)工藝均通過WHO-GMP、ISO9001、ISO13485認(rèn)證，

【維生素B12測(cè)定培養(yǎng)基】在CE和FDA具有注冊(cè)登記。

產(chǎn)品信息

中文：維生素B12測(cè)定用培養(yǎng)基

英文：Vitamin B12 Assay Medium

品牌：HiMedia?

規(guī)格：100G/瓶

貨號(hào)：M036

儲(chǔ)存溫度：8℃下密閉保存，理想是放置于干燥器中。

質(zhì)控

該產(chǎn)品出廠前經(jīng)廠家嚴(yán)格檢測(cè)，確保合格后方予放行。具體質(zhì)控包括：

外觀（粉末顏色、均一度、是否結(jié)塊）

溶水后的培養(yǎng)基顏色和透明度

pH值（8.5% 水溶液，25℃）

培養(yǎng)反應(yīng)（對(duì)萊士曼乳酸桿菌ATCC 7830 在35-37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)）

生長(zhǎng)試驗(yàn)（用美國(guó)藥典維生素B12標(biāo)準(zhǔn)品，每管分別加入0.0,0.025,0.050,0.075,0.1,0.125,0.150和0.2ng，觀察菌株的連續(xù)生長(zhǎng)狀況，在620nm測(cè)定吸光度）

（注：分別為對(duì)照，空白，標(biāo)準(zhǔn)品1，標(biāo)準(zhǔn)品3，標(biāo)準(zhǔn)品5）


優(yōu)勢(shì)

該產(chǎn)品不含痕量維生素B12，有效避免標(biāo)準(zhǔn)曲線偏移和本底過高，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。