中國藥典可能面臨修改：關于生物制品中的支原體檢測

　　2017年6月28日 威正翔禹生物viansaga導讀：中國藥典可能面臨修改：關于生物制品中的支原體檢測

　　小編今日看到一篇文章，是《中國生物制品學雜志》2015年8月第28卷第8期上的《中國生產用細胞基質污染支原體類型的分析及豬鼻支原體特異性檢測方法的初步建立》，大吃一驚，《中國藥典》2015年檢測生物制品中的支原體所用的方法，可能要面臨修改，因為用培養基分離培養來檢測支原體的方法，對某些支原體，可能根本測不出來！

　　這篇文章的兩個作者都是來自中國食品藥品檢定研究院。文章作者提到：“用于生物制品生產的細胞基質或治療性細胞產品被支原體污染后，支原體或支原體代謝產物可進入人體，并對人體產生嚴重危害。因此，對支原體污染的有效檢測是確保細胞基質及治療性細胞產品質量的前提”。

　　又“據估計，世界范圍內約15%～50%的保藏細胞受支原體污染。據中國醫學科學院細胞中心統計，其2001-2004 年間檢測的不同來源細胞支原體污染率高達約60%。引起體外細胞污染的支原體主要有口腔支原體、發酵支原體、豬鼻支原體、萊氏無膽甾原體等。”“體外培養細胞支原體傳統檢測方法為培養法和指示細胞染色法，這兩種方法是目前世界藥品監督管理機構或組織普遍認可的檢定方法，即”藥典方法“。但其缺點是耗時長，靈敏度低，這也是目前體外培養細胞支原體污染檢出率高低差異較大（5%-87%）的主要原因”。

　　作者對中國食品藥品檢定研究院細胞資源保藏及研究中心收集的70份細胞基質培養上清進行了檢測。這70份樣品已通過培養法及染色法證實存在了支原體污染。這回作者發現其中49份為豬鼻支原體污染。該報道**揭示了豬鼻支原體是導致我國生物制品生產用細胞基質污染最常見的支原體類型。

　　但“豬鼻支原體對生長培養基的營養要求較為苛刻，需要寄生在培養細胞上攝取膽固醇和發酵葡萄糖，而目前《中國藥典》三部（2010 版）支原體培養法要求使用的支原體肉湯培養基及精氨酸支原體肉湯培養基中均不含上述兩種營養物質。因此，理論上培養法無法檢測出豬鼻支原體污染，僅能通過指示細胞感染及染色法進行檢測，但該方法操作繁瑣，實驗過程中的指示細胞狀態和細胞固定及染色的質量均會對檢測結果的判定產生影響，更重要的是該方法缺乏特異性。”

　　因此，大力發展或采用PCR的方法進行生物制品中支原體污染的檢測勢在必行。歡迎采用德國Minerva公司（研究人員來自德國羅伯特·科赫微生物研究所）研制的VenorGeM支原體檢測試劑盒，廣譜、特異，靈敏度高。該系列試劑盒共有四種，其中經典法和熒光定量法已早被歐洲藥典批準，可放心使用。