實驗室用不完的血清可以反復(fù)凍融嗎

血清作為細胞培養(yǎng)重要耗材經(jīng)常被使用，但是有時候血清不能一次性用完很多人會凍起來下次接著用，這樣做會影響血清品質(zhì)嗎？

曾有研究發(fā)現(xiàn)，血清凍融三次，對腫瘤標志物的濃度影響不大，對于血漿，有報道在短時間內(nèi)反復(fù)凍融三次，對總蛋白、白蛋白和免疫球蛋白含量影響不大，但作者推測對免疫球蛋白的活性有影響。最重要的是一篇西北民族學院的文章，《反復(fù)凍融新生牛血清對促細胞生長效應(yīng)的影響》，作者針對SP2/0細胞，用MEM培養(yǎng)基和三批新生牛血清進行培養(yǎng)。血清分別凍融4次至28次不等。然后繪制細胞生長曲線，根據(jù)公式t =T/A , A=log2

Y/X計算細胞倍增時間（t 為細胞倍增時間， Y 為細胞峰值前1 d 的細胞數(shù)， X 為接種細胞數(shù)， T 為細胞生長時間）。結(jié)果顯示：選用的三批新生牛血清在反復(fù)凍融 28 次時， 血清促細胞生長的**增殖量變化不大，均高于1×106/mL, 但是血清促細胞生長的倍增時間在反復(fù)凍融 20次時延長， 即血清促細胞繁殖一代所需的時間在凍融次數(shù)達到 20 次時顯著增加。筆者觀察了一下該文章的結(jié)果列表，發(fā)現(xiàn)在凍融20次之前，細胞倍增時間延長2-3小時不等，20次時，則延長3-4小時。可見，影響還是比較顯著的。該文章的局限是針對新生牛血清，而沒有對胎牛血清進行測試。

國外有人對大鼠血清中的18種化學成分進行了檢測，發(fā)現(xiàn)反復(fù)凍融3次對其中的14種成分沒有顯著影響，其他肌酸激酶，甘油三酯，葡萄糖，膽紅素，甚至包括氯離子有一些明顯變化，但其濃度變化控制在10%以內(nèi)。

總而言之，如果能避免牛血清的反復(fù)凍融，及時分裝，那是最理想的。如果在短時間內(nèi)有幾次反復(fù)凍融，也不必過于擔心。但是，對于胎牛血清，還有一個問題，是反復(fù)凍融增高了血清產(chǎn)生沉淀或渾濁的風險。因為血清在融化時，冰塊和蛋白融化的速度是不一樣的，局部可能因蛋白濃度過高而產(chǎn)生沉淀。同時，如果血清內(nèi)含有少量纖維蛋白原，那么在低溫下也可以形成絮狀沉淀，等到血清再融化時，沉淀就顯現(xiàn)出來了。所以，血清的質(zhì)量也非常重要。

因此對未使用完的血清反復(fù)凍融會影響到產(chǎn)品的品質(zhì)，如果想了解更多血清相關(guān)知識，請咨詢威正翔禹/締一生物資深專家。