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對不同牛齡采血得到的牛血清性能也不同

2020-04-22 10:16來源:威正翔禹|締一生物

牛血清是細胞培養過程中重要的培養基,其質量的好壞影響著細胞狀態。常用的牛血清包括胎牛血清、新生牛血清及小牛血清,分別對不同牛齡采血,小牛血清的采集對象是出生1年之內的小牛,新生牛血清是出生24小時至2周內的新生牛,胎牛血清則是6-10個月的胎牛。

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隨著采血年齡的增加,牛血清中的生長因子減少,抗體和補體等含量增加。因此,鑒別血清原料的采血年齡段,防止成牛血清的參入是血清品質檢測者所面臨的一個重要問題。

有研究人員通過不同年齡段的牛血清在不同濃度下對SP2/0細胞株培養效果的比較試驗,用**增殖濃度、倍增時間、克隆率等指標來推斷樣品血清的采血年齡段,其結果如下:

SP2/0細胞株為鼠骨髓瘤細胞。首先,研究人員在無菌條件下,將7個供試血清0.22μm過濾除菌,然后將供試血清按10%、8%、6%、4%、2%的濃度分別加到MEM培養基稀釋好的細胞懸液中使細胞濃度為1×104/ml。充分混勻后在96孔細胞培養板中每孔接種0.2ml,每個試驗樣接種8孔。每24 h記數一孔,共記數7d。研究人員又將供試血清按8%的血清濃度加到MEM培養基稀釋好的細胞懸液中,將SP2/0細胞稀釋到5個/mL,分別接種到96孔細胞培養板中,每孔0.2mL,每個供試血清樣品接種48孔,一周后計數克隆生成孔數。

結果顯示,在克隆率方面,采血年齡越小,效果越好,胎牛血清培養的細胞克隆率為85.4%,6h新生牛血清為79.1%,6月齡小牛血清為50%。在促細胞生長效應方面,隨著血清濃度從2%提高到10%,細胞**增殖數不斷升高,倍增時間縮短。血清濃度相同時,采血年齡約越小,細胞數最高,倍增時間越短。不同年齡段的牛血清對促細胞生長效應的影響呈現比較明顯的差異性。

上海威正翔禹生物公司提供的Ausbian牛血清為澳洲進口,血清經過嚴格質控,如檢測總蛋白、支原體、牛病毒性腹瀉病毒、牛副流感病毒等,并經0.22m過濾和gamma射線照射,指標達標,經廣泛使用,受到好評。