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THP-4濃縮型培養(yǎng)基4L配置方法

2016-05-28 10:57



THP-4培養(yǎng)基
4升培養(yǎng)基配制方法

包裝
每一個獨立包裝的THP 培養(yǎng)基均包括5個小瓶的液體。
碳酸氫鈉和谷氨酰胺需分別加入。
_____________________________________________________________________
保存
 -20°C凍存為**保存狀態(tài)。
_____________________________________________________________________
準備
待小瓶中的液體完全融化后，劇烈搖晃小瓶，使瓶中的液體均勻。
配制培養(yǎng)基時，

1. 量出3升常溫的雙蒸水或純凈的組織培養(yǎng)水，并加入到攪拌容器中。攪拌時，加入小瓶中的液體，并用常溫的雙蒸水或純凈的組織培養(yǎng)水沖洗小瓶，以確保瓶中的液體完全倒入攪拌容器中。

2. 加入1號和2號小瓶中的液體，然后，再加入9.0 g的碳酸氫鈉，待其完全溶解后，再進行下列操作。
  建議加入谷氨酰胺的濃度為4mM (即：4升培養(yǎng)基中需加入谷氨酰胺2.3g)。注意：如培養(yǎng)基中谷氨酰胺的水平過高，會導致細胞有毒代謝物的生成。

3. 加入3號、4號和5號小瓶中的液體，并用水量來調(diào)節(jié)最后的培養(yǎng)基體積。
不必再調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值。 (培養(yǎng)基已經(jīng)含MOPS緩沖液)!

4. 過濾除菌后，將配制好的培養(yǎng)基置于4-8°C冰箱中避光冷藏。

注意：已過濾除菌且不含谷氨酰胺的培養(yǎng)基配制后的有效期為9個月。不要在大容器中保存少量的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基需避光保存。