彎曲菌的ISO解讀

彎曲菌是一種常見的導致人類腸炎的致病菌，以腹瀉為主要特征，并可從糞便中分離出來。它污染食物和水，夏季是傳染高峰。

彎曲菌為革蘭陰性，螺旋形彎曲，有動力；培養時需3~15%氧，為微需氧菌；氧化酶陽性，還可還原性硝酸鹽。ISO于2017年發布了新版的ISO10272-1:2017標準，即《食品鏈的微生物學，彎曲菌屬檢測和計數的水平方法》，它取代的是舊版ISO 10272-1:2006。具體改變主要是：

1. 包括了二次增菌肉湯（Preston肉湯），主要為了克服背景菌對第三代-內酰胺類抗生素如頭孢哌酮的耐藥；

2. 增加了直接在mCCDA上的接種步驟；

3. 驗證試驗刪掉了微需氧生長，只規定了25℃需氧生長；

該ISO適用于食品、飼料和環境樣品。

ISO10272-1:2017建議的彎曲菌檢測方案，依據樣本類型和檢測目的，分為三種：1）在彎曲菌多的時候，不需要增菌，用方案C；2）對于彎曲菌和背景菌都較少的情況，用方案A，例如烹制過的或低溫食品。取樣后再Bolton肉湯微需氧37℃先培養4-6h，再41.5℃培養44h±4h；3）對于彎曲菌少，背景菌多的情況，例如生肉、生乳，采用方案B，在Preston肉湯中微需氧41.5℃培養24h±2h。

增菌后，方案A是采用mCCD瓊脂和另一款其選擇劑不同于mCCD的彎曲菌選擇分離培養基來分離，方案B是采用mCCD瓊脂來分離。均為微需氧41.5℃培養44h±4h。在mCCD瓊脂上彎曲菌典型菌落為灰色。對于ISO10272-1:2017中方案A所提到的另一款其選擇劑不同于mCCD的彎曲菌選擇分離培養基，可選擇HiMedia公司生產的HiCrome彎曲菌顯色培養基（貨號M2020，配合彎曲菌選擇性添加劑（貨號FD178）一起使用）。該顯色培養基含有復合蛋白胨、氯化鈉、多種顯色劑、生長因子和瓊脂。適用于食品樣本和臨床樣本。培養基配好為在平皿中為黃色透明至輕微不透明凝膠。35-37℃孵育24-48小時后，彎曲菌菌落為淡紫色（下圖），而金葡菌和大腸埃希菌均被抑制。

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