2017弧菌檢測的進展

近年來，創(chuàng)傷弧菌造成的感染事件時常發(fā)生。創(chuàng)傷弧菌已被列為海產(chǎn)品相關的一種重要病原菌，并已躋入弧菌三大病原菌之一。我國關于弧菌的檢測標準主要有《GB 4789.7—2013 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 副溶血性弧菌檢驗》、《食品安全國家標準   食品微生物學檢驗 創(chuàng)傷弧菌檢驗（征求意見稿）》（2017年10月發(fā)布）等。

2017年，ISO更新了弧菌的檢測標準，即ISO 21872-1-2017 食品和動物飼料微生物學 潛在腸道致病性弧菌屬檢測的水平方法 第1部分:副溶血性弧菌、霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌的檢測。該標準取代了2007年舊的版本，主要變化是引入了可選擇的弧菌的分子鑒定方法（包括副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌、霍亂弧菌），并在附錄E上增添了方法評價。但實際上，檢測方法上，ISO和我國標準還有一些不一樣的地方。

ISO指出，對增菌孵育溫度的調(diào)整，可改善食品中弧菌的回收率。例如，在新鮮產(chǎn)品中，增菌時孵育41.5℃可使副溶血性弧菌和霍亂弧菌的回收率提高。在冷凍食品（-18℃以下）或腌制食品中，創(chuàng)傷弧菌、副溶血性弧菌和霍亂弧菌的增菌溫度在37℃可使回收率提高。因此，在**增菌環(huán)節(jié)，ISO推薦的增菌液堿鹽蛋白胨水（ASPW）的孵育溫度為41.5℃或37℃，6h。如果在冷凍或腌制品中三種菌都測，則是在37℃孵育。如果只測創(chuàng)傷弧菌（不論食品類型），也是37℃孵育。如果在新鮮食品中只檢測副溶血性弧菌或霍亂弧菌，則增菌溫度為41.5℃。

ISO還推薦了二次增菌，也是用ASPW，原則同上。分離菌則推薦同時采用TCBS和另一種選擇性固體培養(yǎng)基。對于陽性菌落，驗證可采用生化試驗或PCR、qPCR。生化試驗包括賴氨酸脫羧、精氨酸二氫化酶試驗，-半乳糖苷酶試驗、吲哚試驗等。

世界知名微生物產(chǎn)品供應商HiMedia公司開發(fā)的HiCrome弧菌顯色培養(yǎng)基（貨號MV1682），可同時分離鑒別副溶血性弧菌和霍亂弧菌。該顯色培養(yǎng)基為高（堿性）pH，有助于選擇性分離弧菌屬。它根據(jù)細菌β-半乳糖苷酶和培養(yǎng)基中所包含底物反應的原理，霍亂弧菌菌落呈紫色，副溶血性弧菌菌落呈藍綠色（見下圖）。

該弧菌分離培養(yǎng)基用植物蛋白胨取代動物蛋白胨，更加環(huán)保，也避免了瘋牛病風險，同時價格低于同類進口產(chǎn)品。對于陽性菌落，還可進一步用HiMedia公司生產(chǎn)的弧菌生化鑒定條（貨號KB007）來鑒定。該鑒定條包含了12種傳統(tǒng)的生化試驗，包括伏普試驗、精氨酸脫羧試驗、鹽耐量試驗（1%）、ONPG試驗

、檸檬酸鹽利用試驗、鳥氨酸脫羧試驗、甘露醇發(fā)酵試驗等，操作方便，結(jié)果準確，可鑒定28種弧菌，具體如下：

河口弧菌（V. aestuarianus）

溶藻弧菌（V. alginolyticus）

坎氏弧菌（V. campbellii）

鯊魚弧菌（V. carchariae）

霍亂弧菌（V. cholerae）

辛辛那提弧菌（V. cincinnatiensis）

雙氮養(yǎng)弧菌（V. diazotrophicus）

費氏弧菌（V. fischeri）

河流弧菌（V. fluvialis）

弗尼斯弧菌（V. furnissii）

產(chǎn)氣弧菌（V. gazogenes）

哈維氏弧菌（V. harveyi）

霍氏弧菌（V. hollisae）

火神弧菌（V. logei）

地中海弧菌（V. mediterranei）

麥氏弧菌（V. metschnikovii）

擬態(tài)弧菌（V. mimicus）

飄浮弧菌（V. natriegens）

沙蠶弧菌（V. nereis）

黑美人弧菌（V. nigripulchritudo）

病海魚弧菌（V. ordalii）

東方弧菌（V. orientalis）

副溶血性弧菌（V. parahaemolyticus）

解蛋白弧菌（V. proteolyticus）

殺鮭弧菌（V. salmonicida）

燦爛弧菌（V. splendidus）

塔氏弧菌（V. tubiashii）

創(chuàng)傷弧菌（V. vulnificus）

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在微生物培養(yǎng)和檢測領域，一如既往地為您帶來優(yōu)質(zhì)的服務。如需詳細了解，可訪問公司官網(wǎng)：

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