動物細胞的灌注培養

動物細胞的培養技術自上世紀初出現以來，經歷了一個多世紀的發展，獲得了很大的進步。不僅建立了許多細胞系和培養了許多類型的原代細胞，而且開發了人工合成培養基和無血清培養基，并且出現了細胞工程，哺乳動物細胞的大規模培養獲得了工業化的應用，用于生產重組蛋白、單克隆抗體等生物藥、載體病毒、病毒性疫苗等。開發了微載體、中空纖維管和生物反應器等，并且實現了一種不同以往的培養方式——灌注培養。目前，灌注培養已成為高產率培養細胞的主要方法。

灌注培養是一種動態培養，可提供不斷流動的培養液和消除有害的代謝產物。它包括蠕動泵、熱板、組織載體、氣體擴張器、配套的培養瓶和管子。蠕動泵用于控制通過培養箱的培養液流速。熱板向培養箱提供37 ℃的維持溫度。氣體擴張器用于消除管道中的氣泡。

灌注培養有四個特點：一是能及時地補充營養物質和排出代謝產物，有利于細胞的擴增，實現高密度培養；二是提供穩定的環境，有利于細胞的持續增殖；三是可實現梯度培養，如梯度培養箱的腔面和基底面分別用不同的培養液灌注，更接近體內環境，可用于體外三維組織工程的構建。四是灌注培養檢測廢液中葡萄糖和乳酸濃度，進而更清楚當前細胞培養微環境情況。

在組織工程上的實踐顯示，灌注培養有利于體外高活性有功能軟骨組織工程的構建。灌注培養得到的DN A和糖胺聚糖的含量明顯增高，比用靜態培養的含量多。

灌注培養可用含血清的培養基。但無血清培養基已成為發展的趨勢。只是無血清開發成本高，應用范圍窄，尚未全部替代含血清培養基。

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參考文獻

唐光霞, 陳建蘇. 灌注動物細胞培養及其在組織工程中的應用進展.眼科新進展.2010,30(5):486-491