細胞體外培養應注意的方面

細胞培養是很重要的一門技術。其培養效果受到多方面影響，可匯總如下：

1、溫度。細胞生長需要適宜的溫度。通常來說，人和哺乳動物的細胞培養溫度要在35-37℃，鳥類細胞培養在38.5℃較好，鼠類細胞在34℃適宜生長。細胞對低溫的耐受力比高溫強。

2、分離方法

常用的分離方法有組織塊分離法和酶消化分離法。也有使用抗體或磁珠包被的抗體分離細胞。

3、培養液

1）血清：細胞培養時血清的濃度要控制在5%~20%，過高或過低的血清濃度都不利于細胞的生長和增殖。當然，也可以使用特別配制的商品化的無血清培養基。

2）激素和生長因子：不同的細胞需要不同的激素和因子。常見有：氫化可的松、雌二醇、孕酮、表皮生長因子、成纖維細胞生長因子。許多激素和因子對細胞有促增殖、分化作用。

3）抗生素：最常用的抗菌素是青霉素和鏈霉素。此外,卡那霉素、新霉素、兩性霉素、氯霉素、潮霉素都可以防止細胞培養過程中細菌和真菌的感染。

4）支持物：有些貼壁細胞需要特定的支持物。常見的支持物有滋養細胞或生長基質（如膠原等）。

4、接種的細胞密度：細胞密度過高和過低均不利于細胞生長。

培養液的pH值：不同種動物或是同一種動物的不同部位對pH的要求各不相同。一般情況下，動物細胞培養液的pH值一般在7.2-7.4。除文獻報道外，自己也可進行摸索。如培養瓶蓋已松口，與外界氣體存在交換，培養箱內的CO2濃度以及培養液中的緩沖鹽成分及濃度也可影響培養液的pH值。

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參考文獻

黃蘭蘭,等. 影響動物細胞體外培養因素. 黑龍江動物繁殖. 2005,13(4):16-19