采血年齡對(duì)牛血清性能的影響

牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)基的重要組成部分，其質(zhì)量好壞對(duì)細(xì)胞狀態(tài)及數(shù)量增長(zhǎng)速度影響很大。常用的有胎牛血清、新生牛血清及小牛血清。牛的采血年齡是這三種血清區(qū)分的顯著標(biāo)志。小牛血清的采集對(duì)象是出生1年之內(nèi)的小牛，新生牛血清是出生24小時(shí)至2周內(nèi)的新生牛，胎牛血清則是6-10個(gè)月的胎牛。隨著采血年齡的增加，牛血清中的生長(zhǎng)因子減少，抗體和補(bǔ)體等含量增加。因此，鑒別血清原料的采血年齡段，防止成牛血清的參入是血清品質(zhì)檢測(cè)者所面臨的一個(gè)重要問題。

有研究人員通過不同年齡段的牛血清在不同濃度下對(duì)SP2/0細(xì)胞株培養(yǎng)效果的比較試驗(yàn)，用**增殖濃度、倍增時(shí)間、克隆率等指標(biāo)來推斷樣品血清的采血年齡段，其結(jié)果如下：

SP2/0細(xì)胞株為鼠骨髓瘤細(xì)胞。首先，研究人員在無菌條件下，將7個(gè)供試血清0.22μm過濾除菌，然后將供試血清按10％、8％、6％、4％、2％的濃度分別加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細(xì)胞懸液中使細(xì)胞濃度為1×104／ml。充分混勻后在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔接種0.2ml，每個(gè)試驗(yàn)樣接種8孔。每24 h記數(shù)一孔，共記數(shù)7d。研究人員又將供試血清按8％的血清濃度加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細(xì)胞懸液中，將SP2／0細(xì)胞稀釋到5個(gè)／mL，分別接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔0.2mL，每個(gè)供試血清樣品接種48孔，一周后計(jì)數(shù)克隆生成孔數(shù)。

結(jié)果顯示，在克隆率方面，采血年齡越小，效果越好，胎牛血清培養(yǎng)的細(xì)胞克隆率為85.4%，6h新生牛血清為79.1%，6月齡小牛血清為50%。在促細(xì)胞生長(zhǎng)效應(yīng)方面，隨著血清濃度從2%提高到10%，細(xì)胞**增殖數(shù)不斷升高，倍增時(shí)間縮短。血清濃度相同時(shí)，采血年齡約越小，細(xì)胞數(shù)最高，倍增時(shí)間越短。不同年齡段的牛血清對(duì)促細(xì)胞生長(zhǎng)效應(yīng)的影響呈現(xiàn)比較明顯的差異性。

品名：Ausbian精制新生牛血清

貨號(hào)：VS500N

批號(hào)：1712A

規(guī)格：500ml/瓶

市場(chǎng)價(jià)：1600元

歡樂價(jià)：800元

促銷活動(dòng)：買10瓶送3瓶，100瓶送40瓶

上海威正翔禹生物公司提供的Ausbian精制新生牛血清（貨號(hào)：VS500N）為澳洲進(jìn)口，血源來自新西蘭出生在4天內(nèi)的新生牛。血清經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控，如檢測(cè)總蛋白、支原體、牛病毒性腹瀉病毒、牛副流感病毒等，并經(jīng)0.22m過濾和gamma射線照射，指標(biāo)達(dá)標(biāo)，經(jīng)廣泛使用，受到好評(píng)。

參考文獻(xiàn)

李倬，等.促細(xì)胞生長(zhǎng)效應(yīng)試驗(yàn)對(duì)牛血清采血年齡段判定的探討.西北民族大學(xué)學(xué)報(bào).2003,24(3):59-66