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最新2017年版ISO 22964克羅諾桿菌屬檢測標準解讀2019-04-24 13:19來源:締一生物
阪崎克羅諾桿菌名稱經歷了數次變化。最早因產生黃色素,被稱為黃色陰溝腸桿菌。后來發現該菌與陰溝腸桿菌有所不同,又更名為“阪崎腸桿菌”。 2008年,Iversen等人通過分子生物學技術(如多位點序列分型即MLST)鑒定,將該菌擴大為屬(克羅諾桿菌屬)。目前,克羅諾桿菌至少有7個種。其中阪崎克羅諾桿菌與人的關系最為密切。 克羅諾桿菌耐干燥環境,可在嬰幼兒奶粉、豆粉、營養粉、草本茶、淀粉中存活,在海水中也存在。有報道,在海產干制品中的檢出率可達17.83%。又有人在成都市某城區超市、農貿市場、食品小吃店中調查,發現100份食品樣品中有32份樣品分離出克羅諾桿菌,分離率為32%。 克羅諾桿菌耐高溫,耐紫外線,能產生生物膜對消毒產生抵抗。同時,阪崎克羅諾桿菌對嬰幼兒的感染致死率高,因此,在嬰幼兒食品和乳品中進行檢測非常重要,我國食品安全國家標準在這方面也有規定。 ISO/TS 22964:2017是國際上最新發布的一版克羅諾桿菌屬檢測標準,它取代了2006年版。主要變動是:將檢測范圍從阪崎克羅諾桿菌擴大至整個克羅諾桿菌屬,樣本包括人類食品、動物飼料和食品生產區的環境樣本;mLST肉湯被克羅諾桿菌選擇性肉湯(CSB)所取代;阪崎腸桿菌分離瓊脂被克羅諾桿菌分離顯色瓊脂(CCI)所取代;生化驗證試驗有修正。 ISO/TS 22964:2017制訂的克羅諾桿菌屬檢測過程大致為:1. 預增菌。取樣,在緩沖蛋白胨水(BPW)中34℃-38℃培養18h±2h;2. 增菌。轉移0.1ml預增菌液至10ml CSB,混勻。41.5℃培養24h±2h。3.接種。用接種環接種10ul菌液至克羅諾桿菌顯色培養基(CCI)平板上,41.5℃培養24h±2h。4.挑出典型菌落,在TSA上純培養并進行生化驗證。 CCI平板上典型的克羅諾菌落為小至中等大小(1mm~3mm)藍色或藍綠色菌落。非克羅諾菌落則為白色,或白色同時中心為綠色或灰色、黑色。有些非克羅諾菌為黃色或紅色。 常見的生化驗證包括氧化酶、賴氨酸脫羧、鳥氨酸脫羧、四種糖發酵產酸(阿拉伯糖、山梨醇、蔗糖)、4-硝基苯--D-葡吡喃糖苷的水解。其他如伏普、甲基紅試驗等為可選。克羅諾桿菌屬為氧化酶反應陰性,葡吡喃糖苷的水解和蔗糖發酵產酸陽性,而賴氨酸脫羧和山梨醇產酸均為陰性。 關于克羅諾桿菌選擇性肉湯(CSB),微生物產品供應商HiMedia公司提供有商品化脫水培養基Cronobacter Screening Broth(貨號M1786),1升中加入1管萬古霉素(貨號FD233)制備為完全培養基。HiMedia公司也提供有克羅諾桿菌顯色培養基(CCI),其組成和ISO/TS 22964:2017完全一致,貨號為M2062I。同時,HiMedia公司也提供有4-硝基苯--D-葡吡喃糖苷,貨號為RM10294-1G,歡迎選購。 圖. 克羅諾桿菌顯色培養基(CCI, 貨號為M2062I) 在ISO/TS 22964:2017的附錄3中,還列表列舉了阪崎克羅諾桿菌與其他相似菌的鑒別特征。表中的數字代表者陽性菌株的比例。其中阪崎克羅諾桿菌與陰溝腸桿菌的區別在于:4-硝基苯--D-葡吡喃糖苷水解試驗,阪崎克羅諾桿菌(+),陰溝腸桿菌(基本-);山梨醇發酵,阪崎克羅諾桿菌(-),而陰溝腸桿菌(+),可供檢測人員參考。 上一篇: 進口精制新生牛血清,澳洲來源現貨促銷!
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