研究雙歧桿菌的利器

雙歧桿菌是革蘭氏陽性有分叉的桿菌（Y型，如兩歧雙歧桿菌；也有V型，如嬰兒雙歧桿菌或短桿狀，如長雙歧桿菌）。它越來越得到人類的重視。它作為人類腸道的長期定居菌（在嬰兒中甚至為顯著優(yōu)勢菌），對人的生理作用起到不可忽視的影響，例如：它刺激機體的免疫反應(yīng)，形成腸道屏障，阻止致病菌的入侵，合成人體所需的維生素等。雙歧桿菌制劑常用于治療菌群失調(diào)、腹瀉、幽門螺桿菌陽性的消化道潰瘍等疾病。在酸奶中加入雙歧桿菌作為發(fā)酵菌種，其保健效果也大為提高。曾有**的微生物學(xué)家指出：“光輝的抗生素之后的時代，將是活菌制劑的時代”。

鑒于雙歧桿菌的重要價值，我們常需要將雙歧桿菌同其他乳酸菌區(qū)別開來。現(xiàn)有的《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 雙歧桿菌檢驗》存在一定的局限，在鑒定方面，這個標準只適合食品中僅含有單一雙歧桿菌菌種的鑒定。在計數(shù)方面，它只適合食品中僅含有雙歧桿菌屬的計數(shù)。而在實際情況中，常常是多個菌屬混雜的情況。HiMedia開發(fā)的雙歧桿菌顯色培養(yǎng)基HiCrome? Bifidobacterium Agar，可很好地將雙歧桿菌同乳桿菌區(qū)分開來。

該培養(yǎng)基除了含有必要的營養(yǎng)外，還含有牛奶蛋白，它有助于檢測酪蛋白水解反應(yīng)。如有該反應(yīng)，則菌落會有不透明光暈（短雙歧桿菌為該反應(yīng)陽性）；同時含有多種顯色劑，有助于鑒別乳桿菌和雙歧桿菌。乳桿菌菌落在該培養(yǎng)基上表現(xiàn)為綠色菌落和不透明光暈，嬰兒雙歧桿菌表現(xiàn)為深藍色至藍綠色菌落，短雙歧桿菌表現(xiàn)為粉紅色菌落，有不透明光暈（見下圖）。

HiMedia還提供有雙歧桿菌的生化鑒定試劑盒（貨號KB021），該試劑盒包含了12種生化試驗，為觸酶試驗、阿拉伯糖試驗、纖維二糖試驗、果糖試驗、乳糖試驗、麥芽糖試驗、甘露糖試驗、蜜二糖試驗、棉子糖試驗、蔗糖試驗、木糖試驗、水楊苷試驗。所調(diào)菌落可接種在５ml雙歧桿菌肉湯（M1395）中，35-37℃厭氧培養(yǎng)6-18小時，直到菌液濁度≥0.1OD（620nm）或0.5麥氏單位。然后無菌打開試劑盒，撕掉封條。在鑒定卡中每孔接種50μl菌液，35℃-37℃厭氧孵育24-48小時。孵育后，完成觸酶試驗，在第1孔用接種環(huán)在孔內(nèi)培養(yǎng)基生長表面刮擦取樣，然后蘸到含3%H2O2溶液的干凈試管中。接種環(huán)表面冒泡為陽性反應(yīng)。沒有冒泡為陰性反應(yīng)。然后根據(jù)結(jié)果詮釋表和菌種標準表，完成菌種鑒定。該試劑盒一共可鑒定35種雙歧桿菌。

HiMedia公司還提供了一款雙歧桿菌選擇性計數(shù)瓊脂（貨號M1734），用于發(fā)酵乳和乳酸菌飲品中的雙歧桿菌計數(shù)。該培養(yǎng)基含有高純度的低聚半乳糖，很好的支持雙歧桿菌生長；同時含有鹽酸半胱氨酸，創(chuàng)造出雙歧生長所需的還原條件；而培養(yǎng)基中的莫匹羅星則抑制大多數(shù)的乳業(yè)所用的乳酸菌生長。用標準菌株證實，接種的50-100CFU雙歧桿菌能在該培養(yǎng)基中旺盛生長。

雙歧桿菌的鑒定有助于選育優(yōu)良的雙歧桿菌菌株，開發(fā)雙歧桿菌發(fā)酵飲品或制劑。在這方面，HiMedia的雙歧桿菌顯色培養(yǎng)基、生化鑒定試劑盒以及還可提供的雙歧桿菌選擇性計數(shù)瓊脂，無疑為研究人員和質(zhì)檢人員對雙歧桿菌的分離、鑒定和計數(shù)提供了極大的便利。