國標GB4789.4—2016 沙門氏菌檢驗操作步驟

沙門氏菌(Salmonella)為革蘭氏陰性、兩端鈍圓的短桿菌，它比大腸桿菌細, 也是腸桿菌科的一種重要的致病細菌。如果食用了被沙門氏菌污染的食品或者藥品后，將會引起中毒，導致傷寒、腸熱癥、敗血癥和胃腸炎等疾病。根據美國疾病控制和預防中心(CDC)的統計， 每年在美國由沙門氏菌引發食源性疾病常常居于食源性疾病的前列，目前我們食品監管部門依據國標GB4789.4—2016檢測沙門氏菌，具體操作步驟如下：

1預增菌

無菌操作稱取25g(mL)樣品，置于盛有225mLBPW 的無菌均質杯或合適容器內，以8000r/min~10000r/min均質1 min~2 min，或置于盛有225 mLBPW 的無菌均質袋中，用拍擊式均質器拍打1min~2min。若樣品為液態，不需要均質，振蕩混勻。如需調整 pH，用1 mol/mL 無菌 NaOH 或HCl調pH 至6.8±0.2。無菌操作將樣品轉至500mL錐形瓶或其他合適容器內(如均質杯本身具有無孔蓋，可不轉移樣品)，如使用均質袋，可直接進行培養，于36 ℃±1 ℃培養8h~18h。

如為冷凍產品，應在45 ℃以下不超過15min，或2 ℃~5 ℃不超過18h解凍。

2增菌

輕輕搖動培養過的樣品混合物，移取1mL，轉種于10mLTTB 內，于42 ℃±1 ℃培養18h~24h。

同時，另取1mL，轉種于10mL SC內，于36 ℃±1 ℃培養18h~24h。

3分離

分別用直徑3mm的接種環取增菌液1環，劃線接種于一個BS瓊脂平板和一個 XLD瓊脂平板(或 HE瓊脂平板或沙門氏菌屬顯色培養基平板)，于36℃±1℃分別培養40h~48h(BS瓊脂平板)或18h~24h(XLD瓊脂平板、HE瓊脂平板、沙門氏菌屬顯色培養基平板)，觀察各個平板上生長的菌落。

沙門氏菌屬顯色培養基平板，締一生物為您推薦使用HiMedia公司（國際知名微生物公司）的沙門氏菌顯色培養基(貨號：MV1296），該培養基用植物蛋白胨取代了動物蛋白胨，安全性更高；并建立在Rambach培養基配方（2）基礎上。Rambach的配方，是基于沙門氏菌代謝丙二醇產酸的原理。但該培養基僅僅用顯色底物就能鑒別出沙門氏菌這一生化特性。它用于分離和鑒別沙門氏菌，與大腸菌群相區分，具有更高的敏感度。

沙門氏菌顯色培養基（貨號：MV1296）在35-37℃孵育24-48小時后觀察到的培養特征

4生化試驗

三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗、靛基質試驗或選擇生化鑒定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統進行鑒定。推薦使用HiMedia公司沙門氏菌生化鑒定試劑盒（KB011）

沙門氏菌生化鑒定試劑盒（KB011）包含的生化鑒定反應有：

甲基紅試驗（MR） VP試驗 尿素酶 H2S產生 檸檬酸發酵 賴氨酸脫羧ONPG試驗

乳糖發酵 阿拉伯糖發酵 麥芽糖發酵 甘露醇發酵衛矛醇發酵

5血清學鑒定

檢查培養物有無自凝性、多價菌體抗原(O)鑒定、多價鞭毛抗原(H)鑒定、血清學分型(選做項目)

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在微生物培養和檢測領域，一如既往地為您帶來優質的服務。如需詳細了解，可訪問公司官網：http://m.13851990668.com/ ；咨詢電話：400-166-8600。