李斯特菌顯色培養基的應用

李斯特菌屬( Listeria．spp) 經常存在于各種動物和環境中，來源于土壤和水中的李斯特菌可能污染人類消費品，特別是即食食品。與其他常見致病菌相比，單核細胞增生李斯特菌的感染率雖然較低，但致死率高達 20%～50%。因此，高效精確地從食品等樣品中分離和鑒別出單核細胞增生李斯特菌，對食品質量控制和疾病預防治療有重要意義。

ISO、FDA 及我國衛生部推薦的標準方法和替代方法是用 PALCAM 和顯色培養基進行檢測和分離。傳統的PALCAM 經過長期的應用驗證，能有效地分離李斯特菌，但無法區分致病和非致病的李斯特菌，另外許多七葉苷陽性的菌也會產生一些假陽性及干擾。

近年來興起的李斯特菌顯色培養基，通常是采用屬特異性β－葡萄糖苷酶和磷脂酰肌醇或膽堿酶顯色技術。平板制備時對磷脂酰肌醇或膽堿配套試劑要求嚴格，溫度過高會產生絮狀物，難以觀察到菌落特征，溫度過低又易凝固而不能再次加熱溶解。

實驗過程中顯色培養基的質量，直接決定實驗的成敗。推薦使用進口產品，HiMedia公司（國際知名微生物培養基生產商）生產的顯色培養基，其他顯色培養基廠家比較，HiMedia顯色培養基在普通顯色培養基的基礎上改良，形成自己獨特產品，顯色效果區分明顯，特異性較強，產品種類更豐富。如對于李斯特菌的檢測，目前有5款產品可以選擇。

產品1：單增李斯特氏菌顯色培養基（貨號：MV1540）

選擇鑒別性分離單核細胞增生李斯特氏菌。

它的特點是可區分單增李斯特氏菌與英諾克李斯特氏菌，但無法區分單增李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌。該培養基完全符合我國食品安全檢測標準GB4789.30-2016，國標首選 ALOA法。

原理：依據李斯特菌特有的β-葡糖苷酶及磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C（PIPLC）活性。

產品2：HiCrome單增李斯特氏菌鑒別瓊脂基礎（貨號：M2009）

與貨號MV1540不同的是依據李斯特菌的β-半乳糖苷酶和磷脂酰膽堿特異性磷脂酶C（PCPLC活性）注：不是PIPLC

產品3：HiCrome單增李斯特氏菌快速鑒別瓊脂基礎（貨號：M1924）

該培養基適用于快速鑒定和鑒別單增李斯特菌，并與其他李斯特菌菌種區分。

原理：除了依據 “β-葡糖苷酶”、和“PIPLC活性”外，增加了“鼠李糖發酵”的檢測，從而對綿羊李斯特菌（伊氏李斯特氏菌）、英諾克李斯特菌和單增李斯特氏菌三者能夠進行區分。

產品4：單增李斯特氏菌驗證瓊脂基礎（MV1552）

用于從臨床和食品樣本選擇性分離鑒別單核細胞增生李斯特菌。

原理：依據PIPLC活性和α-甲基-D-甘露糖苷的發酵。

它不是顯色培養基，但能區分單增李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英諾克李斯特氏菌。

產品5：HiCrome李斯特氏菌瓊脂基礎（M1417，M1417F）

從食品和臨床樣本中快速選擇、鑒別、鑒定李斯特菌。

M1417、M1417F均能鑒別出李斯特菌。此外，M1417還能鑒別是否發酵鼠李糖，M1417F能鑒別是否發酵木糖，因而能區分伊氏和單增。

實驗過程中，可以根據具體的需求進行選擇，HiMedia公司生產的顯色培養基與傳統培養基相比，克服了傳統培養基在各種細菌分離、鑒別、計數等操作過程中比較復雜（需要有經驗的技術人員）、耗時較長、敏感性低和特異性差的缺點。

Himedia顯色培養基在檢測細菌時，通常培養24小時通過觀察菌落顏色即能用肉眼對細菌進行定性或定量分析，既縮短了檢測時間，減少了生化鑒定的過程，極大提高工作效率。

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