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阪崎腸桿菌的檢驗方法介紹

2018-09-21 10:06來源：締一生物


傳統(tǒng)的檢驗方法


傳統(tǒng)的阪崎腸桿菌分離檢測方法，依賴于生化和形態(tài)學(xué)特點，國際上通常以美國 FDA 頒布的“嬰兒配方奶粉中阪崎腸桿菌的分離計數(shù)”作為經(jīng)典方法。2008年我國也制定了阪崎腸桿菌檢驗國家標(biāo)準(zhǔn)，并于2010 年、2016年進行了修訂，規(guī)范了阪崎腸桿菌檢測，目前依據(jù)我國最新食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗GB4789.40—2016檢測阪崎腸桿菌。


檢驗程序：檢樣 100 g（mL）+ BPW 稀釋液 900mL→ 1 mL+Mlst-Vm→阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基→挑取疑似菌落→TSA→挑取黃色菌→生化鑒定→報告。


阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基，可選用國際上HiMedia公司生產(chǎn)的阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基（貨號：MV1577），該培養(yǎng)基適用于從食物、牛奶和奶制品中分離鑒定阪崎克羅諾桿菌屬（阪崎腸桿菌），采用無瘋牛病風(fēng)險的植物蛋白胨取代了動物蛋白胨，植物源成分，優(yōu)質(zhì)品質(zhì)，值得信賴。若檢測進出口食品依據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)可選用另一款崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基（貨號：MV1641），該培養(yǎng)基遵循ISO /TS 22964: 2006。



基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜檢驗法


基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜（MAL-DITOF- MS）法是將被測樣品以一定的比例與基質(zhì)溶液相混合，利用脈沖激光照射激發(fā)基質(zhì)，致使高分子生成分子離子以及分子離子的多聚體，在一時間飛行質(zhì)譜儀中加速與檢測，結(jié)果被測高分子按質(zhì)量數(shù)的大小進行分離，經(jīng)過處理形成質(zhì)量圖譜，通過軟件分析比較，篩選并確定出特異性(指紋) 圖譜，從而實現(xiàn)對目標(biāo)微生物種或菌株的區(qū)分和鑒定。但分析成本高，儀器價格及日常維護費用貴。


分子生物學(xué)檢驗方法


目前用于乳制品中的阪崎腸桿菌的分子生物學(xué)檢驗方法包括普通PCR法（電泳法）、DNA環(huán)介導(dǎo)等恒擴增（LAMP）檢驗法和熒光 PCR 法等。這種方法克服了傳統(tǒng)檢驗方法的操作繁瑣、耗時長、不易分辨結(jié)果等缺點。也使得針對阪崎腸桿菌開展的快速檢測方法迅速發(fā)展。但采用該方法也存在需要樣品中測定菌濃度高、分析成本高、操作繁瑣，無法鑒定是否有活菌存在等缺點。