葉酸是乳酸桿菌生長的必需營養(yǎng)素，微生物法檢測葉酸是利用乳酸桿菌生長速度與葉酸含量相關(guān)的原理建立的。與其他葉酸檢測的方法相比，微生物法具有許多優(yōu)點：樣品預(yù)處理簡單、對設(shè)備要求不高、成本低廉等。"/>
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微生物法測定葉酸含量的改進(jìn)

2018-09-10 09:51來源：締一生物


葉酸是乳酸桿菌生長的必需營養(yǎng)素，微生物法檢測葉酸是利用乳酸桿菌生長速度與葉酸含量相關(guān)的原理建立的。與其他葉酸檢測的方法相比，微生物法具有許多優(yōu)點：樣品預(yù)處理簡單、對設(shè)備要求不高、成本低廉等。


許多國際機構(gòu)都將微生物法作為葉酸分析的標(biāo)準(zhǔn)方法，我國國家標(biāo)準(zhǔn)《嬰幼兒配方食品和乳粉通用檢驗方法》中測定葉酸的方法即為微生物法。1988 年 Horrne 等應(yīng)用 96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板以干酪乳酸桿菌(Lactobacillias Casei)對葉酸進(jìn)行微量檢測，將甘油冷凍保存乳酸桿菌與96孔酶標(biāo)板相結(jié)合，使得測定時間大為縮短。菌株對多數(shù)葉酸形式反應(yīng)相似，能測定單和多谷氨酸葉酸，靈敏度很高，能達(dá)到ng 水平，具有較高的靈敏度和重現(xiàn)性。


這一方法對菌種的處理、分裝和保存，以及操作過程都作了重大改進(jìn)，已被認(rèn)為是目前最可靠、簡便、迅速和微量檢測葉酸的方法。




96 孔板微生物法測葉酸能夠獲得準(zhǔn)確、可靠、重復(fù)性好的結(jié)果。稀釋倍數(shù)對測定結(jié)果影響不大，結(jié)果穩(wěn)定。考慮其成本低廉，樣本預(yù)處理簡單以及對設(shè)備要求不高等優(yōu)點，適合于大批量測定，可用于大樣本的血液流行病學(xué)研究。此方法還可用于其他生物組織和食品中葉酸含量的測定，這對國內(nèi)開展葉酸檢測有著較大的意義。


應(yīng)用96孔板法測定葉酸含量時，選擇測定用葉酸培養(yǎng)基，這里推薦的是國際上HiMedia公司生產(chǎn)的葉酸測定用培養(yǎng)基（貨號：M543），該培養(yǎng)基由國際**Himedia Laboratories生產(chǎn)，嚴(yán)格遵循國際標(biāo)準(zhǔn)，國產(chǎn)葉酸培養(yǎng)基含有痕量葉酸，易導(dǎo)致測定結(jié)果偏高，實驗準(zhǔn)確性比較差，HiMedia葉酸測定用培養(yǎng)基有國際認(rèn)證的GMP，CE和FDA，ISO9001，ISO13485等證書，成分符合《GB5009.211-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中葉酸的測定》，測定結(jié)果準(zhǔn)確性高。