超級耐藥菌不動桿菌的一種分離方法

不動桿菌是一類不發酵糖類的革蘭氏陰性桿菌，不動桿菌屬（Acinetobacter）分為7種，即醋酸鈣不動桿菌（A. calcoaceticus）、魯菲不動桿菌（A. lwoffi）、鮑曼不動桿菌（A. baumanii）、溶血不動桿菌（A. haemolytius）、瓊氏不動桿菌（A. junii）、約翰遜不動桿菌（A. johnsonii）和抗輻射不動桿菌。

不動桿菌主要存在于各類型的感染中，對大多數常用的抗生素都有耐藥性，包括β內酰胺類和氨基糖甙類。不動桿菌是條件致病菌，也是人體正常菌群的組成部分。該菌粘附力極強，易在各類醫用材料上粘附，而成為貯菌源。存在于健康人皮膚（25%）、咽部（7%），也存在于結膜、唾液、胃腸道及陰道分泌物中。感染源可以是患者自身（內源性感染），亦可以是不動桿菌感染者或帶菌者，尤其是雙手帶菌的醫務人員。傳播途徑有接觸傳播和空氣傳播。在醫院里，污染的醫療器械及工作人員的手是重要的傳播媒介。易感者為老年患者、早產兒和新生兒，手術創傷、嚴重燒傷、氣管切開或插管、行靜脈導管和腹膜透析者，廣譜抗菌藥物或免疫抑制劑應用者，免疫缺陷患者需要使用呼吸機，其感染的風險更大。根據感染部位不同和病情輕重不一，可引起呼吸道感染，創口感染、敗血癥等。在使用呼吸機者中，肺炎發生率約為3%～5%。

臨床上檢測不動桿菌主要是通過細菌培養。傳統分離方法在血平板和麥康凱平板上經35℃~37℃培養18h~24h后，可形成圓形、灰白色、光滑、濕潤、邊緣整齊、直徑2~3mm的菌落，無色素形成，存在菌落與背景區分不明顯，不易分離等缺點，培養方法有尿液培養、痰液培養、咽部黏液培養等。當尿培養陽性者細菌計數應＞10萬/毫升時，判定為不動桿菌感染；痰培養陽性者，每個平板的不動桿菌菌落數應在30個以上。

HiMedia公司（國際知名微生物培養基生產商）生產的HiCrome?不動桿菌顯色培養基（貨號M1938）用于環境和臨床樣本中選擇性分離耐藥的不動桿菌，方便快捷，顯色明顯。產品經過歐盟體系認證，可用于臨床診斷。其特殊蛋白胨提供了氮源、碳源化合物、氨基酸、維生素和其他對生物體重要的生長因子，氯化鈉可以保持滲透平衡，選擇性添加劑可以抑制革蘭氏陽性菌生長。培養基中的顯色混合物使目標菌菌落呈淡紫色，伴有光暈。試驗證實，多重耐藥的鮑曼不動桿菌如ATCC BAA-1605均可被有效分離出來，而其他不耐藥的不動桿菌生長被抑制。ATCC BAA-1605菌株于2006年從加拿大醫院中分離，對頭孢他啶、慶大霉素、替卡西林、哌拉西林、環丙沙星等多種抗生素均有耐藥性。

HiCrome?不動桿菌顯色培養基在配置過程中，無須高壓滅菌，在冷卻至45-50°C需加入兩管復溶的MDR選擇性添加劑（貨號FD271，成分氨芐青霉素鈉鹽和頭孢他啶）或Leeds不動桿菌選擇性添加劑（貨號FD335）。只需在35-37°C培養24h~48h即可得到結果。該產品有多篇國際引用文獻，如2017年發表的印度錫金的轉診醫院對鮑曼不動桿菌分離株β-內酰胺酶的表型分析（Uzma Rehman , Karma Gurmey Dolma , T.Shantikumar Singh. Comparative analysis of various phenotypic methods for the detection of beta-lactamase in Acinetobacter baumannii isolates from a referral hospital in Sikkim, India[J]. Indian Journal of Basic and Applied Medical Research,2017, 6(3) : 226-233）。