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科學(xué)家終于找到不依賴病毒的T細(xì)胞工程化方法2018-07-18 11:03來源:醫(yī)藥資訊
2018年7月11日《Nature》雜志上報告了一種非病毒的方法,它用一種強(qiáng)大的分子“切割和粘貼”系統(tǒng),重寫人類T細(xì)胞中的基因組序列。它依賴于電穿孔,是一種將電場施加到細(xì)胞上使其膜暫時更具滲透性的過程。加州大學(xué)舊金山分校(UCSF)的研究人員發(fā)現(xiàn):當(dāng)一定數(shù)量的T細(xì)胞,DNA和CRISPR“剪刀”混合在一起然后暴露在適當(dāng)?shù)碾妶鲋袝r,T細(xì)胞將會在吸收這些元素,精確地將特定的基因序列整合到基因組中的CRISPR編程位點。 經(jīng)過近一年的反復(fù)試驗,研究人員確定了T細(xì)胞群,DNA量和CRISPR豐度的比例,結(jié)合使用適當(dāng)參數(shù)傳遞的電場,可以有效且準(zhǔn)確地對T細(xì)胞基因組進(jìn)行編輯。為了驗證這些發(fā)現(xiàn),Roth指示CRISPR用綠色熒光蛋白(GFP)標(biāo)記一系列不同的T細(xì)胞蛋白,結(jié)果表明:這種操作是高度特異性的,脫靶的幾率非常低。 實驗結(jié)果表明:在不使用病毒的情況下,研究人員能夠生成大量經(jīng)過重新編程的CRISPR工程化細(xì)胞,表達(dá)出新的T細(xì)胞受體。當(dāng)轉(zhuǎn)移到植入人黑素瘤腫瘤的小鼠中時,工程化的人T細(xì)胞進(jìn)入腫瘤部位并顯示出抗癌活性。 |